临床输血学检验技术—整理笔记

血型：一般指的是指红细胞上的抗原结构。 但广义的血型是血液成分遗传多态性，是人体各种细胞（红细胞、 白细胞、血小板和各种组 织细胞）和各种体液成分抗原性差异。

血型系统：由若干个相应关联的抗原抗体组成的血型体系，称为~。

书上则是由单个基因座或多个紧密连锁的基因座上的等位基因所产生的 一组抗原。

血型集合： 若血型抗原在生化特性、 血清学、 遗传特性上有关系， 但不符合血型系统的标准， 则将其归类为血型集合。

红细胞抗原抗体反应的特点

1、高度特异性：最主要的特点，一种抗原只能与相应的抗体相结合，两者的结合要求在空 间构型、化学成分上相匹配（抗原决定簇 AD 与抗体 Ig 分子的超变区相互适应）

2、可逆性：抗原抗体复合物在一定条件下可以解离，解离后其生物学活性不变，称为抗原 抗体反应的可逆性。 影响抗原抗体复合物生成与解离的因素有抗体亲和力、环境因素 （包括 pH、温度、孵育时间、反应介质离子强度、抗原抗体比例等）

3、比例性： 抗原抗体反应表现出可见的结果， 需要适当的浓度与比例。 抗原一般是多价的， IgG 类抗体为二价， IgM 类抗体是五 ~十价的。若二者比例适当，抗原抗体结合最充分，能 够相互交叉聚集形成网格状复合体，反应快而结果明显，称为等价带。

带现象（zone phenomenon）： —种抗原-抗体反应的现象。在凝集反应或沉淀反应中，由于 抗体过剩或抗原过剩， 抗原与抗体结合但不能形成大的复合物， 从而不出现肉眼可见的反应 现象。抗体过量称为前带，抗原过量称为后带。

4、 阶段性：抗原抗体反应分为两个阶段：致敏阶段（抗体与红细胞表面 AD 特异性结合， 可激活补体） 、凝集阶段（致敏的红细胞相互连接） 。

ABO 血型的遗传及抗原分子结构

ABO 血型抗原基因直接编码特异性糖基转移酶（不编码 ABH 抗原），进而由这些酶合成寡 糖性质 ABO 抗原。

ABO 血型基因位于人类 9 号（9q34.2）染色体，基因编码区有 7 个外显子，A 和 B 型 cDNA 有 7 个核苷酸不同，导致糖基转移酶多肽链上 4 个氨基酸不同，其中第 266 位和 268 位 2 个氨基酸确定 A 或 B 型特异性；

O 型和 A 型 cDNA 核苷酸序列基本一致，区别是 O 型 cDNA 在 261 位有 1 个核苷酸（G）缺失，引起读框移位提前形成 1 个终止密码，肽链合成在 117 位氨基酸终止，产生 1 条短肽链（没有功能）。

①A 基因编码产生 N-乙酰基半乳糖胺转移酶，A 抗原是 N-乙酰基半乳糖；②B 基因编码产

生 D-半乳糖糖基转移酶，B 抗原是 D-半乳糖；③H 基因编码产生 L-岩藻糖糖基转移酶，O 型为 H 抗原，即 L-岩藻糖，④H 抗原（血型基因位于 19q13.3）是 A 和 B 抗原的前体。按照孟德尔的分离与自由组合遗传规律，子代可产生 AA、AO、BB、BO、AB 及 OO 等 6 种基因型，但用抗 A 和抗 B 血清，则只能检测出 A、B、AB 和 O 型 4 种表现型。

ABO 定型实验：

1、正定型：用抗 -A 及抗 -B 试剂与被检测细胞反应，检测红细胞表面是否存在 A 抗原和（或）B 抗原，称为 ~。

2、反定型：用标准 A 细胞及 B 细胞与被检血清反应，检测血清中是否存在抗体（凝集素），称为 ~。

定型原则以检测到红细胞表面抗原为准，有 A 抗原者为 A 型，血清中有抗-B；有 B 抗原者为 B 型，血清中有抗 -A；A、B 抗原均有者为 AB 型，血清中无抗体；A、B 抗原均无者为 O 型，血清中有抗 A、抗 B 或抗-A,B。

【抗体特点】

A/B 型者的 ABO 抗体以 IgM 类为主。机体内各种分泌液和体液中的 ABO 抗体多为 IgA 类抗体。O 型者的抗 -A,B 以 IgG 类抗体为主，可以通过胎盘。

抗-A,B 不是抗-A 与抗-B 的混合物，试验提示它识别的是 A 抗原和 B 抗原上共同的表位。

交叉配血试验：是输血前必须做的红细胞系统的配合性试验，以确定受者或供者血液没有可测的不相配合的抗原和抗体成分，试验包括主侧和次侧配血。

【主侧】是受血者血清与供血者红细胞的反应，检测患者体内是否存在针对供者红细胞抗体。【次侧】是受血者红细胞和供血者血清的反应，检测供者血液中是否有针对患者红细胞的抗体。

1. 高度特异性：最主要的特点，一种抗原只能与相应的抗体相结合，两者的结合要求在空 间构型、化学成分上相匹配（抗原决定簇 AD 与抗体 Ig 分子的超变区相互适应）

2. 可逆性：抗原抗体复合物在一定条件下可以解离，解离后其生物学活性不变，称为抗原 抗体反应的可逆性。 影响抗原抗体复合物生成与解离的因素有抗体亲和力、环境因素 （包括 pH、温度、孵育时间、反应介质离子强度、抗原抗体比例等）

3. 比例性： 抗原抗体反应表现出可见的结果， 需要适当的浓度与比例。 抗原一般是多价的， IgG 类抗体为二价， IgM 类抗体是五 ~十价的。若二者比例适当，抗原抗体结合最充分，能 够相互交叉聚集形成网格状复合体，反应快而结果明显，称为等价带
   带现象（zone phenomenon）： —种抗原-抗体反应的现象。在凝集反应或沉淀反应中，由于 抗体过剩或抗原过剩， 抗原与抗体结合但不能形成大的复合物， 从而不出现肉眼可见的反应 现象。抗体过量称为前带，抗原过量称为后带。

4. 正定型：用抗 -A 及抗 -B 试剂与被检测细胞反应，检测红细胞表面是否存在 A 抗原和（或）B 抗原，称为 ~。

5. 膜转运蛋白，2、受体及粘附分子，3、补体调节糖蛋白，4、酶活性，5、维持红细胞的完整性，6、构成细胞外糖链基质，7、血型抗原多态性方面的意义。
   红细胞血型抗体的分类

6. “天然抗体”（无可察觉的抗原刺激而形成的抗体，多为 IgM），

7. 免疫抗体（由可查知的抗原刺激而产生的抗体，多为 IgG），

8. 规则抗体：ABO 系统内的抗体，即抗-A，抗-B，

9. 不规则抗体：也称意外抗体，是指 ABO 血型系统，也就是抗-A、抗-B 以外的红细胞抗体（包含 7 和 8），它不符合兰茨泰纳规律， 筛查方法：盐水介质法、聚凝胺法、抗人球蛋白试验、酶法、微柱凝胶卡式检测法

10. 不完全抗体（能使红细胞致敏，但在盐水中不能凝集之），

11. 同种抗体（针对患者所缺的抗原产生的抗体），

12. 自身抗体（针对自身抗原而产生的抗体） ，

13. 冷凝集：有些冷凝集素可在 32 C 时凝集红细胞，更有些极高效率的冷凝集素引起的红细胞凝集在 37C 中孵育仍不散开。

14. 假凝集：某些高分子物质、血清蛋白异常、低离子强度及酸性环境等均可造成红细胞假 凝集。
    多凝集红细胞： 是指红细胞膜发生异常后， 红细胞与所有其他人的血清， 甚至自身的血清都 出现凝集。引起多凝集的原因有两种，一种是获得性（包括微生物和非微生物），另一种是遗传性。

抗人球蛋白试验

【原理】

大部分 IgG 抗体与具有相应抗原的红细胞在盐水介质中能够特异性结合，但不发生肉眼可见的凝集反应， 为不完全抗体。 其只能与一方抗原决定簇结合， 不能同时与双方红细胞抗原 决定簇结合， 所以在盐水介质中， 不完全抗体只能致敏红细胞，不能使其出现肉眼可见的凝 集现象。加入抗球蛋白试剂后，抗球蛋白分子的 Fab 片段与包被在红细胞上的球蛋白分子的 Fc 片段结合，通过抗球蛋白分子的搭桥作用而产生红细胞凝集， 未被抗体致敏的红细胞不会发生凝 集。

【分类与应用】

15. 直接 coombs 试验：将抗人球蛋白试剂直接加到表面结合抗体的受检红细胞中，即可见细胞凝集。用于检测吸附于红细胞表面的不完全抗体。主要用于新生儿溶血病（HDN ）的诊断、免疫溶血性输血反应的调查、自身免疫性溶血性贫血（ AIHA ）的诊断

16. 间接 coombs 试验：将受检血清和具有相应抗原性的红细胞相结合，再加入抗人球蛋白 抗体即可出现可见的红细胞凝集。 用于检测血清中游离的不完全抗体。 主要应用于： 交叉配 血及血型鉴定、器官移植、妊娠所致免疫性学型抗体及自身免疫
    性血型抗体的检出和鉴定、检查用其他方法不能查明的红细胞抗原、白细胞和血小板抗体试验等。

吸收放散试验 抗原抗体可在适当条件下发生凝集或致敏，这种结合是可逆性的，若改变实验条件，抗体可以从红细胞上解离下来，再检测解离下来的抗体，即~。

一、吸收试验

【原理】被检血清抗体加入已知抗原的红细胞，或被检抗原红细胞加入已知效价的特异性抗血清，产生抗原抗体反应，离心后分离经过抗原吸收的血清。将吸收前与吸收后的血清用生理盐水做倍比稀释再与已知抗原的红细胞共同孵育，检查血清中的抗体效价。若吸收后的血清效价低于吸收前，证明抗体已被红细胞吸附，血清中含有与红细胞抗原对应的抗体，或被检红细胞与加入的已知抗原的红细胞血型相同。

1.

父母血型为 AXB 型，一般子代血型可能为（ ）型 A 、 A 或 B B 、 A、B 或 O C 、 A、B 或 AB D 、 A、B、O 或 AB

答案：D

2.

下列哪一项属于红细胞血型系（ ） A 、 RH 血型 B 、 P 血型 C 、 MN 血型， D 、 以上均是

答案：D

3.

特殊情况下，AB 型血浆（ ） A 、 只能输给 AB 型人 B 、 能输给 AB 型或 O 型人 C 、 能输给 A 型、B 型或 AB 型人 D 、 能输给 A 型、B 型、O 型或 AB 人

答案：D

4.

A 型人血清中含有抗体为（ ） A 、 抗 A B 、 抗 B C 、 抗 O D 、 抗 A 及抗 B

答案：B

5.

RH 阴性一般是指（ ） A 、 C 抗原阴性 B 、 D 抗原阴性 C 、 E 抗原阴性 D 、 CDE 抗原阴性

答案：B

6.

输血有很多危险性，其中（ ）与输入血液抗体的含量有直接关系 A 、 输血后肝炎 B 、 细菌性反应 C 、 致敏作用 D 、 非心源性水肿

答案：C

7.

输血前的血型血清学试验，通常包括（ ） A 、 ABO、RH 定型 B 、 抗体筛选和鉴定 C 、 红细胞交叉配合试验 D 、 以上均是

答案：D

8.

用 CPD-A 保养液采集的全血保存期为（ ） A 、 14 天 B 、 21 天 C 、 28 天 D 、 35 天

答案：D

9.

手术或外伤失血在 500 毫升以下（ ） A 、 必须输血 B 、 不要输血 C 、 输注血浆 D 、 必须输注多种成分血

答案：B

10.

中国汉族人群中，RH(D)阴性的发生率是（ ）

A 、 99.40% B 、 96% C 、 4% D 、 0.4%

答案：D

11.

冷沉淀物主要成份为（ ） A 、 VIII+IX 因子 B 、 I+II+VII 因子 C 、 II+V+VII+IX 因子 D 、 纤维蛋白原+ VIII 因子+纤维结合蛋白

答案：D

12.

液态血小板保存的适宜温度是（ ） A 、 4℃ B 、 -20℃～-40℃ C 、 20～24℃天 D 、 37℃

答案：C

13.

血小板输注无效的可能原因有（ ） A 、 产生 RH 抗体 B 、 产生 HLA 抗体 C 、 产生 GM 抗体 D 、 以上均不是

答案：B

14.

全血输注不是缺点（ ） A 、因含有 WBC、BPC 可使受血者产生抗体 B 、含有的 WBC、BPC 和凝血因子的量很少 C 、对血容量正常的病人，输注后不会引起循环超负荷 D 、易引起发热反应

答案：C

15.

新鲜全血中粒细胞丧失功能为第（ ）天 A 、 1 天 B 、 7 天 C 、 14 天 D 、 21 天

答案：A

16.

VIII 因子在全血内保存（ ）后活性下降 50% A 、 1 天 B 、 7 天 C 、 14 天 D 、 21 天

答案：A

17.

输血相关性移植物抗宿主病(TA-GVHD)是由于（ ）引起？ A 、 红细胞 B 、 淋巴细胞

C 、血小板 D 、单核细胞

答案：B

18.

最有效预防 TA-GVHD 的方法有 ( ) A 、贫血者尽量输注红细胞 B 、输血前血制品进行 r 线照光 C 、使用白细胞过滤器 D 、输注病毒灭活血浆

二、 问答题：

答案：C

19.

（ D ）输血 2000ml，应 10%补葡萄糖酸钙： A.5ml B.10ml C.15ml D.20ml E.25ml

答案：D

20.

（ C ）输血时患者出现腰背剧痛，尿呈酱油色，应立即： A.减慢点滴速度 B.取端坐位 C.停止输血 D.加压给氧 E.以上都不对

答案：C

21.

（ B ）对血液病患者尤为适用的是： A.库存血 B.新鲜血 C.血尿 D.成分血 E.代血浆

答案：B

22.

（ C ）保存库血适宜的温度和日期为： A.2℃，2～3 周 B.2℃，4～8 周 C.4℃，2～3 周 D.4℃，4～8 周 E.35℃，4～8 周

答案：C

23.

（ D ）输血前后或两袋血之间应选用何种溶液静脉滴注： A.10%葡萄糖溶液 B.5%葡萄糖溶液 C.林格氏液 D.0.9%氯化钠溶液 E.注射用水

答案：D

24.

（ B ）直接输血法时，每 100ml 血中加入 3.8%枸橼酸钠溶液： A.5ml B.10ml C.15ml D.20ml E.25ml

答案：B

1.

阶段性：抗原抗体反应分为两个阶段：致敏阶段（抗体与红细胞表面 AD 特异性结合， 可激活补体） 、凝集阶段（致敏的红细胞相互连接） 。

ABO 血型的遗传及抗原分子结构

ABO 血型抗原基因直接编码特异性糖基转移酶（不编码 ABH 抗原），进而由这些酶合成寡 糖性质 ABO 抗原。

ABO 血型基因位于人类 9 号（9q34.2）染色体，基因编码区有 7 个外显子，A 和 B 型 cDNA 有 7 个核苷酸不同，导致糖基转移酶多肽链上 4 个氨基酸不同，其中第 266 位和 268 位 2 个氨基酸确定 A 或 B 型特异性；

O 型和 A 型 cDNA 核苷酸序列基本一致，区别是 O 型 cDNA 在 261 位有 1 个核苷酸（G）缺失，引起读框移位提前形成 1 个终止密码，肽链合成在 117 位氨基酸终止，产生 1 条短肽链（没有功能）。

①A 基因编码产生 N-乙酰基半乳糖胺转移酶，A 抗原是 N-乙酰基半乳糖；②B 基因编码产

生 D-半乳糖糖基转移酶，B 抗原是 D-半乳糖；③H 基因编码产生 L-岩藻糖糖基转移酶，O 型为 H 抗原，即 L-岩藻糖，④H 抗原（血型基因位于 19q13.3）是 A 和 B 抗原的前体。按照孟德尔的分离与自由组合遗传规律，子代可产生 AA、AO、BB、BO、AB 及 OO 等 6 种基因型，但用抗 A 和抗 B 血清，则只能检测出 A、B、AB 和 O 型 4 种表现型。

ABO 定型实验：

2.

反定型：用标准 A 细胞及 B 细胞与被检血清反应，检测血清中是否存在抗体（凝集素），称为 ~。

定型原则以检测到红细胞表面抗原为准，有 A 抗原者为 A 型，血清中有抗-B；有 B 抗原者为 B 型，血清中有抗 -A；A、B 抗原均有者为 AB 型，血清中无抗体；A、B 抗原均无者为 O 型，血清中有抗 A、抗 B 或抗-A,B。

【抗体特点】

A/B 型者的 ABO 抗体以 IgM 类为主。机体内各种分泌液和体液中的 ABO 抗体多为 IgA 类抗体。O 型者的抗 -A,B 以 IgG 类抗体为主，可以通过胎盘。

抗-A,B 不是抗-A 与抗-B 的混合物，试验提示它识别的是 A 抗原和 B 抗原上共同的表位。

交叉配血试验：是输血前必须做的红细胞系统的配合性试验，以确定受者或供者血液没有可测的不相配合的抗原和抗体成分，试验包括主侧和次侧配血。

【主侧】是受血者血清与供血者红细胞的反应，检测患者体内是否存在针对供者红细胞抗体。【次侧】是受血者红细胞和供血者血清的反应，检测供者血液中是否有针对患者红细胞的抗体。

附：【自身对照】患者红细胞与自身血清反应，以排除自身抗体等干扰因素影响实验判读。观察是否出现凝集或溶血，只有均不凝集或溶血才能输血，否则应进一步查找原因。交叉配血试验均应在 37C 孵育。除了盐水介质法外，还有酶法、抗球蛋白配血法、凝聚胺配血法及凝胶配血法。

特殊问题

① 红细胞缗钱状的形成：多发性骨髓瘤、巨球蛋白血症、霍奇金病；② 交叉配血试验结果不相容，显示有同种抗体；③ 在室温反应中显示有自身抗体；④ 抗体筛选阴性和交叉配血结果阳性；⑤ 离心力不当，造成假阴性和假阳性；⑥ 水浴箱温度不正确；⑦ 红细胞洗涤不当；⑧ 血清中补体存在而致溶血。

抗体效价测定（antibody titration）：是测定血清中抗体浓度的半定量方法。对待检血浆或血清进行连续倍比稀释，以肉眼可见凝集的最高稀释倍数的倒数来表示效价。

唾液定型：ABH 抗原不仅存在于红细胞膜上，还程度不同地存在于很多其他体液当中，其中以唾液含量最多，这些血型物质都是半抗原，并且是水溶性的。凡是唾液中有血型物质的为分泌型，否则为非分泌型。

红细胞血型抗原的生物功能

3.

外源凝集素（动植物体内凝集人红细胞的凝集素）。

亚型：亚型是指虽属同一血型抗原，但抗原结构/性质或抗原表位数有一定差异的血型。

A、B 血型均有亚型，最主要 A 亚型的是 A1、 A2 亚型，占全部 A 型血的 99.9%， 由于 A 抗原中存在 A1、A2 亚型，故 AB 血型中也有 A1B 、A2B 两个亚型。我国 A、AB 血 型者中以 A1 、A1B 亚型为主， A2、 A2B 亚型在 A 与 AB 型中仅占 1%。

A 亚型最主要的血清学特征是红细胞抗原数量减少， 红细胞与试剂血清表现为若凝集或不凝 集，与抗 -H 反应较强，某些人血清中有抗 -A1.

A1 与 A2 共遗传时，表型为 A1，A2 则被隐蔽； A2 人血清中约 18%存在抗 A1 抗体， A2B 人中 2235 存在抗 A1 抗体。

1 获得性 B :指 A 型个体的红细胞和抗-B 试剂出现弱凝集，但血清中有正常抗 -B,该抗-B 不与自身红细胞凝集。 若在血型鉴定中不重视反定型， 又未能严格交叉配血，会发生严重溶 血性输血反应。

一般见于肠梗阻患者，肠道细菌入血后其脱乙酰基酶使 A 抗原表位 N-乙酰半乳糖胺脱乙酰基，成为半乳糖胺，类似于 B 抗原表位 D- 半乳糖，与抗 -B 试剂出现弱凝集。