细菌学检验 · 免费试读
备考精编（系统复习版）（节选）
细菌学检验一重点总结
第一章 细菌学实验的基本要求
1、实验室生物安全(Laboratory biosafety): 实验室的生物安全条件和状态不低于容许水平，可避免实验室人员、来访人员、社区及环境受到不可接受的损害，符合相差法规、标准等对实验室生物安全责任的要求。
2、生物安全防护基本要求
实验室生物安全防护（biosafety protection for laboratories）
- 实验对象：致病的微生物及其毒素
- 综合措施：实验室设计建造、个体防护设施、工作及操作程序和规程等
- 确保：实验室工作人员不受实验对象侵染，周围环境的生物安全。
实验室生物安全通用原则
- 积极防止操作者在污染的环境中接触生物危害物；
- 主动封闭生物危害材料产生之源，防止从操作部位向周围环境释放；
- 尽量减少生物危害材料向周围环境意外释放所造成的后果。
3、实验室必须设有专职的生物安全负责人
实验室负责人为实验室生物安全的第一责任人。
生物安全等级
- 生物安全防护实验室根据所处理的微生物及其毒素的危害程度分为四级。
- 实验室生物安全防护要求：一级最低，四级最高。
4、在主实验室合理设置清洁区、半污染区和污染区
5、各级生物防护实验室特点
- 一级生物安全防护实验室（BSL-1/P1）：适用于对健康成年人已知无致病作用的微生物，如用于教学的普通微生物实验室等。
- 二级生物安全防护实验室（BSL-2/P2）
实验室结构和设施、安全操作规程、安全设备适用于对人或环境具有中等潜在危害的微生物。
在处理危险度 2 级或更高危险度级别的微生物时，在实验室门上应标有国际通用的生物危害警告标志。
- 三级生物安全防护实验室（BSL-3/P3）：适用于主要通过呼吸途径使人传染上严重的甚至是致死疾病的致病微生物及其毒素，通常已有预防传染的疫苗。
- 四级生物安全防护实验室（BSL-4/P4）：适用于对人体具有高度的危险性，通过气溶胶途径传播或传播途径不明，目前尚无有效的疫苗或治疗方法的致病微生物及其毒素。
6、控制措施
- 安全设备和个体防护是实验室工作人员与致病微生物及其毒素直接接触的一级屏障。
- 所有可能使致病微生物及其毒素溅出或产生气溶胶的操作，都必须在生物安全柜内进行。
7、生物安全柜（BSC）biosafety cabinet(概念、分级及特点)
- 具备气流控制及高效空气过滤装置的操作柜，可有效降低实验过程中产生的有害气溶胶对操作者和环境的危害。(净化排气)
- 根据生物安全防护水平的差异，生物安全柜可分为 I、II、III级 3 种类型。
- 实验室应按要求分别配备 I、II、III级生物安全柜。
I级生物安全柜：外部空气
- 保证工作人员不受侵害，但不保证实验对象不受污染。
II级生物安全柜：经高效过滤器净化的无涡流的单向流空气
- 既保证工作人员不受侵害，也保证实验对象不受污染；
III级生物安全柜：经高效过滤器净化的无涡流的单向流空气
8、生物安全柜和超净工作台的区别
超净工作台：保护样品，不保护操作者和环境 生物安全柜：保护操作者、环境以及实验材料
正压、简单 负压、复杂
- 不能以净化工作台代替生物安全柜，反之则可以。
9、标准的细菌等微生物操作要求
- 实验室负责人......工作人员洗手、工作区域不允许吃/喝/抽 ......戴护目镜或面罩、食物储存
- 禁止口吸吸管、减少飞溅物/气溶胶、工作台表面的去污/灭活、废物去污后处理 10、注：高压蒸汽灭菌：负责消毒者不准离开消毒室。 制备培养基......· 无菌操作.、使用酒精灯、灭菌吸管......10 倍递增稀释......无菌操作； 三三制：稀释三级，每一稀释度用三个平行平板；取供试液加注于平皿时，供试液须充分混匀。 培养基倾注于平皿：45°C±1°C、整个操作过程应在 1h 内完成、无菌检验...... 第二章、细菌学检验基本技术 临床样本的采集与送检 | 样本 | 采样时间 | 采样方法 | 注意事项 | | :--- | :--- | :--- | :--- | | 血骨髓 | 发病早期、急性期或症状典型时 | 成人 10ml，儿童 3～5ml；骨髓 1～2ml。 | 样本切勿冰箱存放；无菌操作；废弃物高压灭菌。 | | 尿液 | 晨起 | 中段尿 | 防杂菌污染，无菌操作。尽快送检，不得加防腐剂或消毒剂。 | | 粪便 | 急性期 | 脓血、黏液的粪便；絮状物；直肠拭子 | 无菌采样；新鲜；立即送检 。 | | 痰上呼吸道样本 | 晨间<br>无限制 | 自然咳痰、支气管镜、胃内采痰法等；鼻咽拭子 | 漱口；立即送检或 4°C保存。 |
考场背诵速记版（节选）
-
不产毒的白喉棒状杆菌，携带了 β—棒状杆菌噬菌体后便可产生这种现象称为：D
三、问答题 -
中和剂对消毒剂的消毒效果起着至关重要的作用，试简述具体实验分组。
-
简述细菌分子检测的技术，至少说出三种，并解释其原理与步骤。
-
生物安全实验室的具体分类与分别检测的微生物类型。
-
实验室生物安全(Laboratory biosafety): 实验室的生物安全条件和状态不低于容许水平，可避免实验室人员、来访人员、社区及环境受到不可接受的损害，符合相差法规、标准等对实验室生物安全责任的要求。
-
生物安全防护基本要求
实验室生物安全防护（biosafety protection for laboratories）- 实验对象：致病的微生物及其毒素
- 综合措施：实验室设计建造、个体防护设施、工作及操作程序和规程等
- 确保：实验室工作人员不受实验对象侵染，周围环境的生物安全。
实验室生物安全通用原则
- 积极防止操作者在污染的环境中接触生物危害物；
- 主动封闭生物危害材料产生之源，防止从操作部位向周围环境释放；
- 尽量减少生物危害材料向周围环境意外释放所造成的后果。
-
实验室必须设有专职的生物安全负责人
实验室负责人为实验室生物安全的第一责任人。生物安全等级
- 生物安全防护实验室根据所处理的微生物及其毒素的危害程度分为四级。
- 实验室生物安全防护要求：一级最低，四级最高。
- 生物安全防护实验室根据所处理的微生物及其毒素的危害程度分为四级。
-
在主实验室合理设置清洁区、半污染区和污染区
-
各级生物防护实验室特点
- 一级生物安全防护实验室（BSL-1/P1）：适用于对健康成年人已知无致病作用的微生物，如用于教学的普通微生物实验室等。
- 二级生物安全防护实验室（BSL-2/P2）
实验室结构和设施、安全操作规程、安全设备适用于对人或环境具有中等潜在危害的微生物。
在处理危险度 2 级或更高危险度级别的微生物时，在实验室门上应标有国际通用的生物危害警告标志。
- 三级生物安全防护实验室（BSL-3/P3）：适用于主要通过呼吸途径使人传染上严重的甚至是致死疾病的致病微生物及其毒素，通常已有预防传染的疫苗。
- 四级生物安全防护实验室（BSL-4/P4）：适用于对人体具有高度的危险性，通过气溶胶途径传播或传播途径不明，目前尚无有效的疫苗或治疗方法的致病微生物及其毒素。
-
控制措施
- 安全设备和个体防护是实验室工作人员与致病微生物及其毒素直接接触的一级屏障。
- 所有可能使致病微生物及其毒素溅出或产生气溶胶的操作，都必须在生物安全柜内进行。
- 生物安全柜（BSC）biosafety cabinet(概念、分级及特点)
- 具备气流控制及高效空气过滤装置的操作柜，可有效降低实验过程中产生的有害气溶胶对操作者和环境的危害。(净化排气)
- 根据生物安全防护水平的差异，生物安全柜可分为 I、II、III级 3 种类型。
- 实验室应按要求分别配备 I、II、III级生物安全柜。
I级生物安全柜：外部空气
- 保证工作人员不受侵害，但不保证实验对象不受污染。
II级生物安全柜：经高效过滤器净化的无涡流的单向流空气
- 既保证工作人员不受侵害，也保证实验对象不受污染；
III级生物安全柜：经高效过滤器净化的无涡流的单向流空气
- 生物安全柜和超净工作台的区别
超净工作台：保护样品，不保护操作者和环境 生物安全柜：保护操作者、环境以及实验材料
正压、简单 负压、复杂
- 不能以净化工作台代替生物安全柜，反之则可以。
- 标准的细菌等微生物操作要求
- 实验室负责人......工作人员洗手、工作区域不允许吃/喝/抽 ......戴护目镜或面罩、食物储存
- 禁止口吸吸管、减少飞溅物/气溶胶、工作台表面的去污/灭活、废物去污后处理
- 注：高压蒸汽灭菌：负责消毒者不准离开消毒室。
制备培养基......· 无菌操作.、使用酒精灯、灭菌吸管......10 倍递增稀释......无菌操作； 三三制：稀释三级，每一稀释度用三个平行平板；取供试液加注于平皿时，供试液须充分混匀。 培养基倾注于平皿：45°C±1°C、整个操作过程应在 1h 内完成、无菌检验...... 第二章、细菌学检验基本技术 临床样本的采集与送检 | 样本 | 采样时间 | 采样方法 | 注意事项 | | :--- | :--- | :--- | :--- | | 血骨髓 | 发病早期、急性期或症状典型时 | 成人 10ml，儿童 3～5ml；骨髓 1～2ml。 | 样本切勿冰箱存放；无菌操作；废弃物高压灭菌。 | | 尿液 | 晨起 | 中段尿 | 防杂菌污染，无菌操作。尽快送检，不得加防腐剂或消毒剂。 | | 粪便 | 急性期 | 脓血、黏液的粪便；絮状物；直肠拭子 | 无菌采样；新鲜；立即送检 。 | | 痰上呼吸道样本 | 晨间<br>无限制 | 自然咳痰、支气管镜、胃内采痰法等；鼻咽拭子 | 漱口；立即送检或 4°C保存。 |
题库训练版（节选）
1.
证明细菌具有鞭毛结构的常用方法是： E A. 革兰染色法 B. 抗酸染色法 C. 普通琼脂培养法 D. 液体培养法 E. 半固体培养法
答案：E
2.
革兰染色法在临床上常用于： B A. 鉴别细菌的血清型别 B. 协助临床选择用药 C. 诊断疾病 D. 解释发病机制 E. 判定细菌的免疫性
答案：B
3.
测量细菌的常用单位是： B A. mm B. μm
C. nm D. pm E.
答案：B
4.
不属于细菌的基本结构的是： D A. 细胞壁 B. 细胞膜 C. 细胞浆 D. 细胞器 E. 核质
答案：D
5.
细菌细胞壁的最主要成分是： B A. 脂类 B. 蛋白质 C. 糖类 D. 脂蛋白 E. ***聚糖
答案：B
6.
不属于细胞基本结构的是： A A. 鞭毛 B. 中介体 C. 细胞膜 D. 核糖体 E. 核质
答案：A
7.
青霉素抗菌作用的机理是： A A. 干扰菌细胞壁的合成 B. 破坏菌细胞壁上的磷壁酸 C. 干扰菌细胞蛋白质的合成 D. 破坏菌细胞膜的通透性
E. 破坏菌细胞壁的多糖骨架
答案：A
8.
病原菌引起疾病的最佳组合是： A
A. 毒力+侵入门户+细菌数量 B. 毒素+侵袭力+侵入门户 C. 侵袭力+细菌数量 D. 细菌数量+侵袭酶类 E. 侵入门户+毒素+细菌表面结构
答案：A
9.
细菌内毒素的特点下列哪项是错误的： C
A. 主要由 G—菌产生 B. 化学成分主要是脂多糖 C. 对人体组织有选择性毒性作用 D. 可单独激活补体旁路途径 E. 可使鲎血液变形细胞溶解物凝固 细菌学检验一重点总结****第一章 细菌学实验的基本要求 答案：C
全题目阅读版（节选）
1.
证明细菌具有鞭毛结构的常用方法是： E A. 革兰染色法 B. 抗酸染色法 C. 普通琼脂培养法 D. 液体培养法 E. 半固体培养法
答案：E
2.
革兰染色法在临床上常用于： B A. 鉴别细菌的血清型别 B. 协助临床选择用药 C. 诊断疾病 D. 解释发病机制 E. 判定细菌的免疫性
答案：B
3.
测量细菌的常用单位是： B A. mm B. μm
C. nm D. pm E.
答案：B
4.
不属于细菌的基本结构的是： D A. 细胞壁 B. 细胞膜 C. 细胞浆 D. 细胞器 E. 核质
答案：D
5.
细菌细胞壁的最主要成分是： B A. 脂类 B. 蛋白质 C. 糖类 D. 脂蛋白 E. ***聚糖
答案：B
6.
不属于细胞基本结构的是： A A. 鞭毛 B. 中介体 C. 细胞膜 D. 核糖体 E. 核质
答案：A
7.
青霉素抗菌作用的机理是： A A. 干扰菌细胞壁的合成 B. 破坏菌细胞壁上的磷壁酸 C. 干扰菌细胞蛋白质的合成 D. 破坏菌细胞膜的通透性
E. 破坏菌细胞壁的多糖骨架
答案：A
8.
溶菌酶的杀菌机理是：E
A. 干扰菌细胞壁交联桥的合成
B. 干扰二氨基庚二酸的活性
C. 破坏聚糖骨架上四***侧链的连接
D. 干扰菌细胞核质的活性
E. 破坏菌壁多糖骨架 β-1、4 键的连接
9.
关于 L 型细菌叙述错误的是：C
A. 由于细胞壁缺陷常呈多形态
B. 染色体不易着色
C. 无致病力
D. 常规细菌学检查多呈阴性
E. 除去诱导因素可回复成原来的细菌
10.
质粒是细胞的：A
A. 染色体以外 DNA
B. 核质 RNA
C. 储存高能的胞浆颗粒
D. 胞浆中 rRNA
E. 中介体
11.
关于菌毛叙述错误的是：A
A. 是细菌的运动器官
B. 分为普通菌毛和性菌毛
C. 成分是蛋白质
D. 普通菌毛与细菌的致病性有关
E. 普通光学显微镜下不能看见
12.
细菌的革兰染色性不同主要是因为：D
A. 形态不同
B. 营养需要不同
C. 生理功能不同
D. 细菌细胞壁结构不同
E. 致病性不同
13.
细菌学形态学检查中最常用染色方法是：E
A. 抗酸性染色法
B. 特殊染色法
C. 暗视野墨汁染色法
D. 美兰单染色法
E. 革兰染色法
14.
细菌的繁殖形式是：D
A. 接合
B. 裂殖
C. 胞子
D. 二分裂
E. 复制
15.
在细菌生长曲线中菌数增加最快的是：B
A. 迟缓期
B. 对数期
C. 稳定期
D. 衰亡期
E. 全部生长过程
16.
有关热原质叙述错误的是：D
A. 是多数 G-菌少数 G+菌合成代谢产物
B. 是 G-菌细胞壁中脂多糖
C. 注入人、动物体可引起发热 D. 可被 121°C20 分钟处理破坏 E. 可经吸负剂、石棉滤板除掉
17.
下列那种不是细菌的合成代谢产物： E
A. 色素 B. 细菌素 C. 抗生素 D. 维生素 E. 抗毒素
18.
关于噬菌体生物学特性叙述错误的是：B
A. 是细菌的病毒 B. 不具有抗原性 C. 主要成分是核酸和蛋白质 D. 形态多呈蝌蚪状 E. 较细菌的抵抗力强
19.
简述菌种保藏方法及原则。
A. 转导 B. 转化 C. 接合 D. 溶原性转换 E. 原生质体融合
20.
病原菌引起疾病的最佳组合是： A
A. 毒力+侵入门户+细菌数量 B. 毒素+侵袭力+侵入门户 C. 侵袭力+细菌数量 D. 细菌数量+侵袭酶类 E. 侵入门户+毒素+细菌表面结构
答案：A
21.
细菌内毒素的特点下列哪项是错误的： C
A. 主要由 G—菌产生 B. 化学成分主要是脂多糖 C. 对人体组织有选择性毒性作用 D. 可单独激活补体旁路途径 E. 可使鲎血液变形细胞溶解物凝固 细菌学检验一重点总结****第一章 细菌学实验的基本要求
答案：C
22.
Hp 与下列哪种疾病无关？D A.十二指肠溃疡 B.胃炎 C.肝癌 D.肺炎
23.
Hp 的快速检测方法是下列哪种？C A.氧化酶试验 B.触酶试验 C.尿素酶实验 D.硝酸盐还原实验
布鲁菌属
1 以下不属于布鲁菌属的生物学特性的是:D A 革兰阴性杆菌 B 严格需氧菌 C 硝酸盐还原实验阳性 D 具有运动性
2 布鲁菌的实验室常用培养基是____或____。（肝浸液培养基、改良厚氏培养基）
气单胞菌属
24.
分离培养——普通平板、血平板、Baird-Parker 平板、高盐甘露醇平板、卵磷脂高盐平板等
金葡球菌鉴定培养基 — S. aureus ID：灰绿色菌落为金葡球菌
法国科玛嘉金黄色葡萄球菌显色培养基（CHROMagar™ Staph aureus）：金黄色葡萄球菌：紫色；
其他：
蓝色、无色。
链球菌检验程序
痰、脓、穿刺液、咽拭等 脑脊液 血液 增菌培养（葡萄糖肉汤等，5%CO₂） 直接涂片染色 检测抗原 分离培养 初步报告 接种血平板（5%CO₂） 可疑菌落（性状、溶血） 鉴定试验 血 清 学 分 类 鉴 定 杆 菌 肽 敏 感 试 验 opto-chin 敏 感 试 验 胆 盐 溶 菌 试 验 其 他 鉴 定 试 验 报告 图 9-2 链球 CLIN-LAB.COM
检验方法： • 脓汁、咽拭、痰液和渗出物可直接涂片检查。 • 增菌培养接种肉浸液葡萄糖肉汤或匹克肉汤。 • 分离培养接种血平板做需氧和厌氧培养，观察菌落形态。
鉴定试验 • β 溶血者做杆菌肽敏感试验，敏感者为 A 群链球菌，耐药者做胆汁-七叶苷试验（阳性为黑色反应），阳性者为 B 群链球菌，同时做 CAMP 试验也应为阳性；阴性者为 A、B、C 群以外的其他链球菌； • α 溶血者做 Optochin 试验，敏感者为肺炎链球菌，耐药者做胆汁-七叶苷试验，阴性者为草绿色链球菌； • 不溶血者做 6.5%氯化钠试验，阴性者为其他链球菌。